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“M-MuLV反转录酶”参数说明
| 用途1： | 逆转录 | 用途2： | Cdna第一链合成 |
“M-MuLV反转录酶”详细介绍
概述：
莫洛尼氏鼠白血病病毒 (M-MuLV) 反转录酶是一种RNA介导的DNA聚合酶。该酶能以RNA (合成cDNA时) 或单链DNA为模板(1-3)，由引物起始合成一条互补的DNA。M-MuLV反转录酶无3′→5′核酸外切酶活性。
来源：
重组E. coli菌株，含有从M-MuLV中克隆的反转录酶基因。
应用：
1. cDNA第一链的合成。
2. 合成cDNA探针。
反应条件：
1× M-MuLV反转录酶反应体系含：1× M-MuLV反转录酶反应缓冲液 [50 mM Tris-HCl (pH 8.3, 25°C), 75 mM KCl, 3mM MgCl2, 10 mM DTT]，适量dNTPs (不随酶附赠)，37°C或42°C温育。
质量检测:
核酸内切酶活性：50 μl反应体系中，500 U本酶与1 μg的pUC19质粒于37°C温育4小时，电泳条带无明显变化。
核酸外切酶活性：50 μl反应体系中，1000 U本酶与1 μg的Hind III消化的λDNA于37°C温育4小时，电泳条带无明显变化。
RNase活性：25 μl反应体系中，1000 U本酶与250 ng的大肠杆菌rRNA于37°C温育2小时，经琼脂糖电泳检测，被降解的rRNA小于1%。
纯度：经SDS-PAGE (考马斯亮蓝染色) 检测其纯度大于90%。
质保声明：
M-MuLV反转录酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。
单位定义：
1单位指以poly (rA) 为模板、oligo (dT) 为引物，在37°C条件下，10分钟内催化1 nmol的dTTP 掺入形成酸不溶性沉淀物所需要的酶量。
参考文献:
1. Verma, I.M. (1975). J. Virol. 15, 843-854.
2. Gerard, G.F. and Grandgenett, D.P. (1975). J.Virol. 15, 785-797.
3. Roth, M.J., Tanese, N. and Goff, S.P. (1985). J.Biol. Chem. 260, 9326-9335.
莫洛尼氏鼠白血病病毒 (M-MuLV) 反转录酶是一种RNA介导的DNA聚合酶。该酶能以RNA (合成cDNA时) 或单链DNA为模板(1-3)，由引物起始合成一条互补的DNA。M-MuLV反转录酶无3′→5′核酸外切酶活性。
来源：
重组E. coli菌株，含有从M-MuLV中克隆的反转录酶基因。
应用：
1. cDNA第一链的合成。
2. 合成cDNA探针。
反应条件：
1× M-MuLV反转录酶反应体系含：1× M-MuLV反转录酶反应缓冲液 [50 mM Tris-HCl (pH 8.3, 25°C), 75 mM KCl, 3mM MgCl2, 10 mM DTT]，适量dNTPs (不随酶附赠)，37°C或42°C温育。
质量检测:
核酸内切酶活性：50 μl反应体系中，500 U本酶与1 μg的pUC19质粒于37°C温育4小时，电泳条带无明显变化。
核酸外切酶活性：50 μl反应体系中，1000 U本酶与1 μg的Hind III消化的λDNA于37°C温育4小时，电泳条带无明显变化。
RNase活性：25 μl反应体系中，1000 U本酶与250 ng的大肠杆菌rRNA于37°C温育2小时，经琼脂糖电泳检测，被降解的rRNA小于1%。
纯度：经SDS-PAGE (考马斯亮蓝染色) 检测其纯度大于90%。
质保声明：
M-MuLV反转录酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。
单位定义：
1单位指以poly (rA) 为模板、oligo (dT) 为引物，在37°C条件下，10分钟内催化1 nmol的dTTP 掺入形成酸不溶性沉淀物所需要的酶量。
参考文献:
1. Verma, I.M. (1975). J. Virol. 15, 843-854.
2. Gerard, G.F. and Grandgenett, D.P. (1975). J.Virol. 15, 785-797.
3. Roth, M.J., Tanese, N. and Goff, S.P. (1985). J.Biol. Chem. 260, 9326-9335.